Эксклюзионная хроматография

  • Эксклюзионная хроматография

    Эксклюзионная хроматография (ЭХ)
    Принцип ЭХ заключается в разделении белков на основании различий в молекулярной массе. Элюция образцов проводится изократически (один буферный раствор, градиент отсутствует). Поскольку состав буферного раствора не оказывает непосредственного влияния на разрешение, буферная среда может меняться в зависимости от типа образца или требований дальнейшего процесса очистки, анализа или хранения. Белки собираются в очищенном виде в выбранный буфер.


    Выбор хроматографической среды для ЭХ
    В качестве хроматографической среды для ЭХ выбраны пористые матрицы, которые отличаются инертностью, низким связыванием белков, химической и физической стабильностью. Размер пор частицы и диапазон размеров частиц подбирают тщательным образом для получения множества сред с различной избирательностью. Современные среды ЭХ охватывают диапазон молекулярной массы Mr от 100 до 100 000 000, от пептидов до белков очень большой молекулярной массы, белковых комплексов и вирусов.

    • Superdex — оптимальный выбор, обеспечивающий высокое разрешение, небольшую продолжительность процесса и высокий процент выхода.
    • Sephacryl применяется для быстрого разделения с высоким выходом в лабораторных и промышленных масштабах.
    • Superose обеспечивает широкий диапазон фракционирования, но не применяется для разделения в крупных или промышленных масштабах.

    После выбора Superdex, Sephacryl или Superose выберите среду с диапазоном фракционирования, в который входят целевые значения молекулярной массы вашего образца. В случаях, когда две среды характеризуются схожим диапазоном фракционирования, выберите среду с наиболее резким подъемом кривой селективности для оптимального разделения всех компонентов образца.

    Если вас интересует определенный компонент, выберите среду, в которой целевой белок попадает в середину кривой селективности.
    Sephadex — выбор номер один для быстрого комплексного разделения, например для обессоливания и смены буфера. Sephadex применяется в лабораторных и промышленных масштабах перед другими этапами хроматографической очистки, между ними и после них.

GREENVAN